Поиск

Полнотекстовый поиск:
Где искать:
везде
только в названии
только в тексте
Выводить:
описание
слова в тексте
только заголовок

Рекомендуем ознакомиться

'Отчет'
Общественная организация - Московская областная организация общества «Знание» России и Учебный центр «Образование взрослых» приглашают Вас принять уча...полностью>>
'Документ'
Конкретный список документов зависит от обстоятельств и перечня имущества, которое будет получено по наследству. Если вы решите воспользоваться для эт...полностью>>
'Сценарий'
Снегурочка 1: Ты куда это наряжаешься?Снегурочка 2: Как куда? Скоро Новый год. Пойдем с Дедушкой Морозом детей поздравлять с праздником, подарки дарит...полностью>>
'Учебник'
Соловейчик М.С., Кузьменко Н.С. Русский язык. Учебник для 1 класса общеобразовательных учреждений. К тайнам русского языка. – Смоленск: Ассоциация XXI...полностью>>

Главная > Документ

Сохрани ссылку в одной из сетей:
Информация о документе
Дата добавления:
Размер:
Доступные форматы для скачивания:

Дополнение к ОФС 42-0088-11 «Спектрофотометрическое определение фосфора»

Метод предназначен для определения фосфора спектрофотометрическим методом в иммунобиологических лекарственных средствах (ИБЛС). Метод основан на способности неорганического фосфора в кислой среде образовывать с молибденовой кислотой фосфорномолибденовую кислоту, которая в присутствии аскорбиновой кислоты дает цветную реакции. Определение проводится спектрофотометрическим методом. Содержание фосфора определяется по результатам измерения оптической плотности растворов при 825 нм в видимой области спектра по калибровочному графику.

Спектрофотометрический метод

Определение фосфора с содержанием 1,2 -2,4 мкг/мл

В термостойкую пробирку 250 х20 мм вносят 0,2 мл испытуемого образца, прибавляют 0,15 мл реактива для минерализации, закрывают стеклянным колпачком и минерализуют на песочной бане при температуре 180 0 С до образования темно-коричневой жидкости. Минерализацию продолжают при температуре 250 0 С до обесцвечивания содержимого пробирки не менее 10 ч. Одновременно в аналогичных условиях минерализуют контрольный образец, содержащий 0,2 мл растворителя и 0,15 мл реактива для минерализации.

Объем минерализата и контрольного образца доводят водой очищенной до 2 мл, перемешивают, прибавляют 2 мл цветного реактива и вновь перемешивают. Растворы помещают в водяную баню и выдерживают 2 часа при температуре 37 0 С. Измеряют оптическую плотность испытуемых растворов при 825 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором, содержащим 0,15 мл реактива для минерализации, 1,85 мл воды и 2 мл цветного реактива.

Содержание фосфора в 0,5 мл исследуемого образца в микрограммах (Х) вычисляют по формуле:

Х = А х 0,5 ; где

В

А – количество фосфора, найденное по калибровочному графику, в мкг/мл,

В – количество исследуемого образца, взятое на анализ, в миллилитрах.

Построение калибровочного графика. К 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1 мл рабочего раствора калия дигидрофосфата (концентрация фосфора: 0,2; 0,4; 0,8; 1,2; 1,6; 2 мкг/мл) прибавляют воду очищенную до 1,95 мл, 0,05 мл реактива для минерализации и 2 мл свежеприготовленного цветного реактива и выдерживают в водяной бане 2 часа при температуре 37 0 С. Измеряют оптическую плотность калибровочных растворов как описано выше по сравнению с контрольным раствором, содержащим 1,95 мл воды очищенной, 0,05 мл реактива для минерализации и 2 мл цветного реактива. Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс количество мкг фосфора, а по оси ординат – среднее значение показателя оптической плотности при 825 нм.

Калибровочный график воспроизводят при каждом анализе.

Примечания

Приготовление испытуемого раствора. Содержимое каждого флакона (ампулы) растворяют в 0,5 мл растворителя (вода очищенная).

Приготовление основной раствор калия дигидрофосфата (80 мкг фосфора в 1 мл). 0,3509 г (точная навеска) калия дигидрофосфата доведенного до постоянной массы в эксикаторе над безводным кальция хлоридом, помещают в мерную колбу вместимостью 1000мл, прибавляют 500 мл воды, 10 мл 5 М раствора серной кислоты, доводят объем раствора до метки и перемешивают. Основной раствор калия дигидрофосфата хранят при температуре 18 - 25 0 С в течение 18 мес.

Приготовление рабочего раствора калия дигидрофосфата (2 мкг фосфора в 1 мл). 1,25 мл основного раствора калия дигидрофосфата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки и перемешивают. Рабочий раствор калия дигидрофосфата хранят при температуре 2 - 8 0 С в течение 6 мес.

Приготовление реактива для минерализации. Смешивают в равных объемах концентрированную серную кислоту и 65 - 70 % хлорную кислоту. Раствор хранят в вытяжном шкафу при температуре 18 – 25 0 С в течение 18 мес.

Приготовление 5 М раствора серной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл приливают 600-700 мл воды, осторожно при перемешивании добавляют 279,0 мл концентрированной серной кислоты, доводят объем водой до метки и перемешивают. Раствор хранят в вытяжном шкафу при температуре 18 – 25 0 С в течение 12 мес.

Приготовление 1,5 М раствора серной кислоты. В мерную колбу, вместимостью 1000 мл, помещают 500 мл воды, осторожно при помешивании несколькими порциями приливают 83,5 мл концентрированной серной кислоты, доводят объем раствора до метки, охлаждают и перемешивают. Раствор хранят в вытяжном шкафу при температуре 18 – 25 0 С в течение 12 мес.

Приготовление 2,5 % раствора аммония молибдата. 25 г аммония молибдата растворяют при перемешивании в 700 мл кипящей воде очищенной в конической колбе или химическом стакане вместимостью 1000 мл и выдерживают в водяной бане 2 часа при температуре 37 0 С. Раствор оставляют при температуре 18-22 0 С на сутки, затем количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через два слоя фильтровальной бумаги и хранят в склянке из тёмного стекла с притёртой пробкой при температуре 4 – 8 0 С в течение 1 мес.

Приготовление 10 % раствора аскорбиновой кислоты. В мерном цилиндре вместимостью 20 мл растворяют 2 г аскорбиновой кислоты в воде очищенной, полученной в процессе дистилляции, доводят объём раствора до метки и перемешивают. Раствор готовят в день проведения анализа.

Приготовление цветного реактива. Смешивают реактивы в следующем порядке: два объема воды очищенной, один объем 1,5 М раствора серной кислоты, один объем 2,5 % раствора аммония молибдата и один объем 10 % раствора аскорбиновой кислоты. Все реактивы прибавляют при помешивании. Цветной реактив готовят перед проведением анализа.



Похожие документы:

  1. Общая фармакопейная статья определение нуклеиновых кислот офс 42 – по методу Спирина

    Документ
    ... Метод предназначен для определения суммарного количества нуклеиновых кислот в иммунобиологических лекарственных средствах (ИБЛС). Определение количества нуклеиновых кислот проводится спектрофотометрическим методом ...

Другие похожие документы..