Поиск

Полнотекстовый поиск:
Где искать:
везде
только в названии
только в тексте
Выводить:
описание
слова в тексте
только заголовок

Рекомендуем ознакомиться

'Документ'
Заявки на участие в конференции принимаются до 25 октября 2013 года по электронному адресу: artjournal-2013@ . В заявке необходимо указать полностью ф...полностью>>
'Документ'
Дошкольное детство является очень важным и благоприятным периодом для развития одаренности. Однако возможности дошкольного возраста, как показывает пр...полностью>>
'Программа'
14400 3400 3 Физика 0 ( ч) 9 00 15 00 4 Литература 90 (3 ч) 8100 14400 3400 3 Информатика 0 ( ч) 9 00 15 00 4 Иностранный язык 0 ( ч) 9 00 15 00 4 Рус...полностью>>
'Документ'
-сведения о руководителе, консультанте, (Ф.И.О., полностью, полное название образовательного учреждения, должность, адрес образовательного учреждения)...полностью>>

Главная > Документ

Сохрани ссылку в одной из сетей:
Информация о документе
Дата добавления:
Размер:
Доступные форматы для скачивания:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего

профессионального образования

«Северо-Осетинская государственная медицинская академия»

Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ РАЗРАБОТОК

ПО МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

ДЛЯ СТУДЕНТОВ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

ВЕСЕННИЙ СЕМЕСТР

Владикавказ 2012

Под редакцией доктора медицинских наук, профессора, зав. каф. микробиологии ГОУ ВПО СОГМА Л.Я. Плахтий.

Авторский коллектив: к.м.н. Черткоева М.Г., к.м.н. Гатиева Е.И.

Основное назначение указаний – методическая помощь студентам к каждому практическому занятию в весеннем семестре. Указания составлены в соответствии с федеральной программой по микробиологии, вирусологии и иммунологии студентов 1 курса.

РЕЦЕНЗЕНТЫ:

Л.В. Бибаева –д.м.н., профессор, зав.кафедрой биологии с экологией ГОУ ВПО СОГМА Росздрава.

А.А. Подлужная – к.ф.н., доцент кафедры технологии лекарственных форм и организации фармацевтического дела ГОУ ВПО «Северо-Осетинский государственный университет им. К.Л. Хетагурова».

Лабораторная работа №1.

Тема: Морфология прокариотов (бактерий).

Учебная цель:

1. Изучить морфологию отдельных представителей бактерий.

2. Освоить технику микроскопирования.

3. Освоить простой метод окраски микроорганизмов.

Студент должен знать:

1. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории, режим

работы и назначение.

2. Классификацию бактерий.

3. Строение микроскопа.

4. Методы микроскопического исследования.

5. Технику микроскопического исследования.

Студент должен уметь:

1. Приготовить мазок из чистой культуры, окрасить простым способом.

2. Микроскопировать с иммерсионной системой.

План занятия:

  1. Знакомство с правилами работы и основами техники безопасности в микробиологической лаборатории.

  2. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории, режим работы и назначение.

  3. Классификация бактерий.

  4. Морфология бактерий, методы изучения (световая, темнопольная, фазовоконтрастная, электронная микроскопия).

  5. Этапы приготовления мазка.

  6. Простой метод окраски бактерий.

  7. Приготовление мазков из культуры стафилококка и кишечной палочки, окраска простым методом.

  8. Демонстрация препаратов из микрококков, диплококков, тетракокков, сарцин, стафилококков, стрептококков, кишечной палочки, бацилл, вибрионов.

Самостоятельная работа студентов

  1. Приготовление мазка и окраска простым методом (под руководством

преподавателя).

  1. Освоение техники микроскопирования. Микроскопическое изучение

морфологии бактерий:

  1. Просмотр демонстрационного мазка из чистой культуры стафилоккока

(Staphylococcus aureus). Окраска генциан-виолетом.

  1. Просмотр демонстрационного мазка из чистой культуры кишечной

палочки (E. coli). Окраска — водным фуксином.

  1. Оформление протокола исследования.

ИНФОРМАЦИОННЫЙ МАТЕРИЛ ПО ТЕМЕ

  1. Техника приготовления мазков.

Мазки готовят на обезжиренных предметных стеклах, предварительно обрисовав карандашом по стеклу место будущего мазка с противоположной стороны предметного стекла. При росте бактерий на жидкой питательной среде, материал берут стерильной бактериальной петлей, наносят на стекло и растирают над очерченной площадкой. В случае роста бактерий на плотной питательной среде, на предметное стекло предварительно наносят петлей каплю воды и материал растирают.

  1. Бактериальную петлю перед использованием с оставшейся культурой стерилизуют в пламени горелки. Приготовленный мазок высушивают на воздухе или держа высоко над пламенем спиртовки.

  2. После этого препарат фиксируют, для чего мазок стороной, где нет материала, троекратно проводят через середину пламени горелки. Фиксация позволяет убить микробы, прикрепить их к стеклу и, наконец, убитые микробы окрашиваются лучше, чем живые.

2. Техника простых методов окраски

Окраска бактерий преследует цель сделать их резко отличными от фона, что позволяет изучить под микроскопом их морфологию и структуру. В микробиологии используют простые и сложные методы окраски препаратов.

При ПРОСТОМ СПОСОБЕ окраски, мазок окрашивают каким-либо одним красителем, например, водным фуксином (2-3 мин.) или метиленовой синью (2-3 мин.), промывают водой, высушивают и микроскопируют.

3. Техника микроскопирования

В связи с очень малыми размерами бактерий изучение их морфологии возможно только при большом увеличении, достигаемом при помощи иммерсионного масла, которое позволяет создать единую систему между предметным стеклом и особым, х 90- кратным (с черной полоской) объективом.

При микроскопии окрашенных объектов необходимо создать яркое освещение с помощью вогнутого зеркала, поднятого конденсора и полностью открытой диафрагмы.

Каплю иммерсионного масла наносят на область мазка на стекле, лежащем на столе. Затем стекло переносят на столик микроскопа. Иммерсионный объектив погружают в масло осторожно, под контролем глаза до явного контакта объектива с маслом. Затем объектив поднимают, не выводя из капли масла и глядя в окуляр для нахождения объекта исследования («поля зрения»). Четкое изображение препарата достигается регулировкой сначала макровинтом (для обнаружения объекта), а затем микровинтом для регулировки резкости изображения.

Морфология основных форм бактерий

Известны четыре основные формы бактерий:

  1. Кокки- микробы округлой формы, имеющие в диаметре 1-2ц. Они отличаются между собой по взаимному расположению отдельных клеток, которое зависит от способа их деления. Если по окончании деления кокки разъединяются на отдельные шарики, получаются одиночные клетки кокков -Micrococcus.

  2. Группа из двух кокков носит название диплококка -Diplococcus (менингококк, гонококк имеют сходство с бобами, и ланцетовидную форму — пневмококк).

  1. Если деление кокков происходит лишь в одном направлении и образующиеся кокки не разъединяются, то получается нить из шариков в виде цепи, более или менее длинной в зависимости от числа кокков- Streptcoccus.

  2. При делении в двух взаимно перпендикулярых направлениях возникают сочетания по четыре кокка-Tetracoccus.

  3. Если деление происходит в трех взаимно перпендикулярных направлениях, кокки соединяются в виде пакетов (кубиков) и получают название — Sarcina.

  4. Делясь в различных направлениях без особой правильности, кокки образуют беспорядочные скопления клеток, напоминающие виноградные грозди, почему они и получили название Staphylococcus.

Палочковидные микроорганизмы представлены самой многочисленной и разнообразной группой бактерий. В классификации палочковидных форм принято именовать бациллами и клостридиями те палочки, которые способны образовывать споры, а палочки неспособные к спорообразованию, называются бактериями. Палочковидные формы различаются по величине, расположению — поодиночке, парами, цепочкой, беспорядочно и под углом. Очертанию концов — закругленные, обрубленные, утолщенные, заостренные.

Извитые формы-спириллы и спирохеты имеющие вид штопорообразно извитых клеток. К патогенным спириллам относятся возбудитель содоку (болезнь укуса крыс). К извитым также относятся кампилобактерии, имеющие изгибы как у крыла летящей чайки.

Спирохеты — тонкие, длинные, изогнутые (спиралевидной формы) бактерии, отличающиеся от спирилл подвижностью, обусловленной сгибательными изменениями клеток. Спирохеты представлены тремя родами патогенными для человека: Treponema, Borrelia, Leptospira.

Методы диагностики инфекционных заболеваний

  1. Микроскопический метод заключается в приготовлении препаратов (нативных или окрашенных простыми или сложными методами) из исследуемого материала и их микроскопии с применением различных видов микроскопической техники (световая, темнопольная, фазово-контрастная, электронная). В бактериологии микроскопический метод получил название бактериоскопический, в вирусологии — вирусоскопический.

  2. Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на искусственные питательные среды с целью выделения и идентификации чистой культуры возбудителей. В бактериологии культуральный метод получил название бактериологического, а в вирусологии – вирусологического.

  1. Биологический метод (экспериментальный или биопроба) заключается в заражении исследуемым материалом чувствительных или других биологических объектов (куриные эмбрионы, культуры клеток). Его используют для выделения чистой культуры возбудителя, определения типа токсина, определение активности антимикробных химиотерапевтических препаратов.

  2. Серологический метод — заключается в определении титра антител в сыворотке крови больного, реже — в обнаружении микробного антигена в исследуемом материале. С этой целью используются реакции иммунитета.

  3. Аллергический метод заключается в выявлении инфекционной аллергии (ГЗТ) на диагностический микробный препарат — аллерген. С этой целью ставят кожные аллергические пробы с соответственными аллергенами.

Объект изучения медицинских микробиологических лабораторий — патогенные биологические агенты — патогенные для человека микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибы, простейшие). В соответствии с типами микроорганизмов выделяют: бактериологические, вирусологические, микологические, протозоологические лаборатории. Регламентация условий работы с возбудителями инфекционных заболеваний произведена в соответствии со степенью опасности микроорганизмов для человека. Выделяют четыре группы возбудителей.

Группа 1: возбудители особо опасных инфекций: чума, натуральная оспа, лихорадки Ласса, Эбола.

Группа 2:возбудители высококонтагиозных бактериальных грибковых и вирусных инфекций: сибирская язва, холера, лихорадка, сыпной тиф, бешенство.

Группа 3: возбудители бактериальных грибковых, вирусных и протозойных нозологических форм (коклюш, малярия, полиомиелит, лейшманиозы).

Группа 4: возбудители бактериальных, вирусных, грибковых заболеваний (синегнойной инфекции, амебиаза, аспергиллеза).

Микробиологические лаборатории работают с ПБА с возбудителями особо опасных инфекций (группа 1и 2). Особый режим максимально изолированные индивидуальным и общественным риском.



Похожие документы:

  1. Дравоохранения Российской Федерации

    Реферат
    ... Л.В. Бибаева, Г.А. Дзахова, А.Л. Цуциева, А.А. Кониева, Д.А. Еналдиева ГЕНЕТИКА УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ Владикавказ, 2013 Рецензенты: Профессор кафедры биологии ...

Другие похожие документы..