Поиск

Полнотекстовый поиск:
Где искать:
везде
только в названии
только в тексте
Выводить:
описание
слова в тексте
только заголовок

Рекомендуем ознакомиться

'Документ'
О внесении изменения в Порядок расходования средств бюджета Чайковского муниципального района на информирование населения через средства массовой инфо...полностью>>
'Справочник'
федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южно – Российский государственный техничес...полностью>>
'Документ'
Чем отличается комондор от пули? Почему басенджи не умеет лаять? Как выглядит пражский крысарик? Где обитает словацкий чувач? И кто такой кишу? На все...полностью>>
'Рабочая учебная программа'
В последние годы наблюдается резкий всплеск активности на рынке учебной литературы по математике для общеобразовательной школы: появляются десятки нов...полностью>>

Главная > Документ

Сохрани ссылку в одной из сетей:
Информация о документе
Дата добавления:
Размер:
Доступные форматы для скачивания:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения

Российской Федерации

ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Минздрава России

Кафедра биологической химии с курсами медицинской,

фармацевтической и токсической химии.

Биохимия

сборник методических указаний для обучающихся

к лабораторным занятиям

для специальности 060103 – Педиатрия







Красноярск

2013

УДК 577.11 (07)

ББК 28.072

Б 63

Биохимия: сб. метод. указаний для обучающихся к лаборатор. занятиям для специальности 060103- Педиатрия (очная форма обучения) / сост. Г.Е.Герцог, С.К.Антонова, А.Д.Климова [и др.]. – Красноярск : тип. КрасГМУ, 2013. - 139с.

Составители:

к.б.н., доцент Герцог Г.Е.

к.б.н., доцент Труфанова Л.В.

к.б.н., доцент Петрова Л.Л.

старший преподаватель Антонова С.К.

старший преподаватель Климова А.Д.

Сборник методических указаний к лабораторным занятиям предназначен для аудиторной работы обучающихся. Составлен в соответствии с ФГОС ВПО 2011г. по специальности/ направлению подготовки 060103 – Педатрия (очная форма обучения), рабочей программой дисциплины (2012г.) и СТО СМК 4.2.01-11. Выпуск 3.

Рекомендован к изданию по решению ЦКМС (Протокол №__ от «__»________20__).

КрасГМУ

2013г.

Содержание:

Занятие № 1 «Общие свойства ферментов»..…………………………………..…...4

Занятие № 2 «Регуляция активности ферментов»………………………………...10

Занятие № 3 «Значение ферментов в медицине. Контрольная работа по теме «Ферменты»»………………………………………………………………………………..16

Занятие № 4 «Этапы катаболизма. Цикл Кребса»…………………………………21

Занятие № 5 «Дыхательная цепь»……………………………………………….….27

Занятие № 6 «Переваривание углеводов. Обмен гликогена»…………………….33

Занятие № 7 «Гликолиз и глюконеогенез»…………………………………….…..39

Занятие № 8 «Пентозофосфатный путь. Сахар крови его регуляция»…………...46

Занятие № 9 «Гетерополисахариды. Контрольная работа по теме «Обмен углеводов»…………………….……………………………………………………...55

Занятие № 10 «Переваривание липидов. Липолиз и липогенез.

Обмен жирных кислот»………………….……………………………………….…60

Занятие № 11 «Липиды крови. Кетогенез.Обмен холестерина»…………………67

Занятие № 12 «Патологии липидного обмена. Контрольная работа по теме

«Обмен липидов»»……………………………………………………….…………74

Занятие № 13 «Переваривание белков. Обмен аминокислот по карбоксильной группе»……………………………………………………………………………….79

Занятие № 14 «Обмен аминокислот по аминогруппе»……………………………86

Занятие № 15 «Токсичность аммиака и пути его обезвреживания»……………..93

Занятие № 16 «Белки плазмы крови. Обмен гемоглобина. Остаточный азот»…101

Занятие № 17 «Обмен нуклеиновых кислот»……………………………………..108

Занятие № 18 «Взаимосвязь обменов. Контрольная работа по теме

«Азотистый обмен»…………………………..……………………………………..114

Занятие № 19 «Характеристика и биологическое значение витаминов

(занятие-конференция в интерактивной форме)»…………………………….…..119

Занятие № 20 «Введение в биохимию регуляций. Биохимическая

диагностика сахарного диабета (работа малыми группами)»………… ……….124

Занятие № 21 «Регуляция водно-минерального обмена»………………………...130

Рекомендуемая литература………………………………………………………....138

  1. Занятие №1

Тема: «Общие свойства ферментов».

  1. Форма организации занятия: лабораторное занятие.

3. Значение изучения темы: Знание общих свойств ферментов является основой всего курса биохимии, так как в организме все реакции катализируются ферментами. Многие заболевания являются результатом изменения активности ферментов или их полного отсутствия. Кроме того, действие многих лекарств осуществляется за счет изменения активности ферментов. Поэтому знание данной темы является непременным условием успешного обучения не только по биохимии, но и по другим дисциплинам в дальнейшем.

4.Цели обучения:

- общая:

Обучающийся должен обладать следующими общекультурными компетенциями ОК: ОК-1; ОК-5.

Обучающийся должен обладать следующими профессиональными компетенциями ПК: ПК-2; ПК-3.

- учебная :

знать:

- Ферменты. Строение ферментов.

- Отличие ферментов от неорганических катализаторов.

- Активный центр ферментов. Механизм действия ферментов.

- Свойства ферментов, обусловленные белковой природой.

уметь:

- Пользоваться мерной посудой.

- Приготовить ферментный препарат амилазы слюны.

- Провести лабораторную работу, сделать выводы.

владеть:

- Навыками лабораторного дела.

5. План изучения темы:

5.1. 5.1. Контроль исходного уровня знаний:

ТЕСТЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ИСХОДНОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ

1.ЧЕТВЕРТИЧНАЯ СТРУКТУРА СТАБИЛИЗИРУЕТСЯ

1) водородными связями

2) пептидными связями

3) дисульфидными связями

4) ионными связями

5) гидрофобными связями

2. ОРГАНИЧЕСКИЕ КАТАЛИЗАТОРЫ (ФЕРМЕНТЫ) - ЭТО

1) углеводы

2) белки

3) жиры

4) витамины

3.ПРИ ВЫСАЛИВАНИИ БЕЛКИ

1) не теряют своих свойств

2) теряют свои нативные свойства

3) распадаются на аминокислоты

4) диссоциируют на субъединицы

4. ПРОСТЫЕ БЕЛКИ СОСТОЯТ

1) только из аминокислот

2) из аминокислот и витаминов

3) из аминокислот и липидов

4) аминокислот и углеводов

5. АМИНОКИСЛОТЫ В ПЕРВИЧНОЙ СТРУКТУРЕ СОЕДИНЕНЫ

1) дисульфидной связью

2) водородной связью

3) пептидной связью

4) ионной связью

5.2. Основные понятия и положения темы

Ферменты – это биологические катализаторы белковой природы.

Простые ферменты состоят только из аминокислот, а сложные – из двух частей: белковой (апофермент) и небелковой (кофактор).

Если кофактор прочно связан с апоферментом, он называется простетической группой, если непрочно – коферментом.

В отличие от неорганических катализаторов, ферменты:

- действуют в мягких условиях (tо=37оС, рН 7,4, давление 1атм);

- специфичны, т.е. катализируют определенные реакции. При абсолютной специфичности действуют на один субстрат (S), или группу родственных субстратов, а при относительной специфичности действуют на определенный тип связи. Специфичность фермента обусловлена его конформацией:

- обладают высокой эффективностью;

- регулируются, то есть при определенных условиях работают с соответствующими данной ситуации скоростями.

Участок фермента, в котором происходит специфическое связывание субстрата и его превращение в продукт, называется активным центром.

У простых ферментов активный центр состоит из аминокислот. У сложных ферментов, кроме аминокислот, в состав активного центра входит кофактор.

По теории Фишера субстрат подходит к ферменту, как ключ к замку, то есть между конформацией активного центра и конформацией субстрата существует абсолютное пространственное соответствие.

Согласно теории Кошланда, активный центр фермента формируется окончательно при взаимодействии его с субстратом, то есть субстрат меняет активный центр в соответствии своей форме в момент контакта с ферментом.

Механизм действия ферментов

Скорость химической реакции определяется энергией активации (Еакт): чем меньше энергия активации, тем легче (скорее) протекает реакция.

В присутствии фермента (Е) реакция (S Р) делится на несколько стадий.

Вначале фермент (Е) взаимодействует с субстратом (S) с образованием фермент-субстратного комплекса (ЕS). Энергия этой стадии невелика, и комплекс образуется быстро.

На второй стадии происходит образование продукта (Р). Поскольку энергия ES-комплекса уже достаточно высока, то Еакт2 второй стадии будет опять невелика и переходное состояние ES достигается быстро.

Белковая природа ферментов определяет уникальные свойства этих катализаторов:

1. Активность ферментов зависит от температуры.

2. Активность ферментов зависит от рН среды

3. Скорость ферментативной реакции зависит от концентрации субстрата.

4. Зависимость скорости реакции от концентрации фермента.

Определение активности фермента

Активность ферментов определяют:

- по скорости убывания субстрата;

- по скорости образования продукта.

Изоферменты:

Это разновидности ферментов, катализирующие одну реакцию, но отличающиеся по своему составу и физико-химическим свойствам.

Изоферменты имеются у ферментов, имеющих четвертичную структуру. Изоферменты различаются по кинетическим параметрам (Vмакс и Км),

тканевой локализации, электрофоретической подвижности, чувствительности к регуляторам и т.д.

Определение в сыворотке крови активности определенных изоферментов используется для диагностики.

5.3. Самостоятельная работа по теме:

Лабораторная работа

  1. Зависимость активности ферментов и неорганических катализаторов от температуры.

Сравнивают условия действия фермента амилазы и неорганического катализатора НСl. Амилаза гидролизует крахмал до декстринов и мальтозы. Декстрины с йодом дают окраску от сине-фиолетовой до желто-бурой (в зависимости от глубины расщепления). Мальтоза с йодом окраски не дает. НСl при кипячении гидролизует крахмал до мальтозы.

Оборудование:

1.

Штатив с пробирками.

2.

Мерная коническая пробирка.

3.

Пипетки на 1 мл и 2 мл, глазная пипетка.

4.

Термостат.

5.

Водяная баня.

Реактивы: 1. 1% раствор крахмала.

2. Раствор Люголя

3. Дистиллированная вода.

4. 10% раствор НСl

Ход работы. Получение ферментного препарата амилазы слюны: ополаскивают рот водой, затем набирают 10-20 мл дистиллированной воды, выдерживают во рту 2-3 мин и полученный раствор амилазы сливают в стакан.

В 3 пробирки наливают по 2 мл 1% раствора крахмала, в первую добавляют 1 мл амилазы, во вторую и третью – по 1 мл 10% НСl. Первую и вторую помещают в термостат при 37ОС на 10 мин, третью – в хорошо кипящую баню. Через 10 мин все пробирки вынимают и охлаждают холодной водой. Добавляют в них по 6 капель раствора Люголя, сравнивают окраску и делают выводы.

  1. Зависимость активности амилазы от температуры.

Оборудование:

1.

Штатив с пробирками.

2.

Мерная коническая пробирка.

3.

Пипетки на 1 мл и 2 мл, глазная пипетка.

4.

Термостат.

5.

Водяная баня.

Реактивы: 1. 1% раствор крахмала.

2. Раствор Люголя

3. Дистиллированная вода.

4. 10% раствор НСl

5. 0,1 Н раствор Н2SO4.

Ход работы. В 4 пронумерованные пробирки наливают по 0,5 мл амилазы. Пробирку №1 ставят в лед, №2 – в термостат при 370С, №3 – оставляют при комнатной температуре, №4 – в кипящую водяную баню. Через 5 минут, когда содержимое пробирок примет нужную температуру, в пробирку №1 добавляют 2 мл 1% раствора крахмала, охлажденного до температуры тающего льда, во 2-ю, 3-ю и 4-ю пробирки добавляют по 2 мл крахмала комнатной температуры. Во все пробирки сразу же добавляют по 2 капли раствора Люголя. 1-ю, 2-ю и 3-ю пробирки помещают в те же условия, 4-ю пробирку оставляют при комнатной температуре. После исчезновения окраски в пробирке №2 в каждую пробирку добавляют по 1 мл 0,1Н серной кислоты для прекращения действия фермента. Активность амилазы оценивают по конечной окраске содержимого пробирок. Чем выше активность фермента, тем слабее окраска. По полученным результатам построить график зависимости активности амилазы от температуры.

Вопросы к защите лабораторной работы:

1. Какую реакцию катализирует амилаза слюны?

2. Назовите субстраты амилазы.

3. Расскажите о строении субстратов амилазы.

4. Назовите продукты амилазной реакции.

5. Объясните результаты 1-го опыта.

6. С помощью, какой качественной реакции можно обнаружить крахмал?

7. Какой специфичностью обладает амилаза слюны?

8. Обладают ли специфичностью неорганические катализаторы?

9. Объясните результаты 2-го опыта.

10. Что такое денатурация?

11. Подвергаются ли денатурации ферменты? (да, нет; почему?)

12. Для чего необходима инкубация фермента с субстратом?

13. Как можно измерить активность амилазы?

14. Какова зависимость скорости амилазной реакции от концентрации крахмала?

15. К какому классу ферментов относится амилаза слюны?

16. Назовите другие классы ферментов.



Похожие документы:

  1. В связи с проведением 20 ноября 2013 года «Дня правовой помощи детям» информируем о действующих нормативных правовых актах на территории Российской Федерации, п

    Документ
    ... лабораторная диагностика и профилактика норовирусной инфекции. Методические указания ... (специальности) 060103 Педиатрия ( ... Методических рекомендациях по проведению аттестации специальных (коррекционных) образовательных учреждений для обучающихся ...
  2. Б 796 Болтнев, Валентин Егорович. Экология : учеб для студ вузов, обуч по напр.: "Автоматизация технол процессов и пр-ва", "Прикл информатика" / Болтнев

    Документ
    ... лабораторных занятий ... для студентов, обучающихся по специальности 060103.65 "Педиатрия ... ], 2013. ... [сборник] ... 060103 "Педиатрия", 060105 "Медико-профилакт. дело", 060201 "Стоматология", 060601 "Мед. биохимия ... ; Красноярск : СФУ ... занятий, методические указания ...

Другие похожие документы..